外泌體（Extracellular Vesicles, EVs）因具備細胞間訊息傳遞能力與天然靶向性藥物遞送潛力，已廣泛 應用於再生醫療、細胞治療、基因治療及醫美領域。隨著臨床試驗與商業化需求快速成長，外泌體製程 面臨以下關鍵挑戰：

• EV 結構脆弱，容易因高剪切力而受損

• 傳統離心法難以放大、效率低、重現性差

• 大體積製程需要穩定、高回收率且符合 GMP 的下游純化方案

Repligen 提供專為外泌體設計的 切向流過濾（TFF / TFDF）平台，協助客戶建立可商業化的標準製程。

完整 Downstream Workflow

1. KrosFlo® TFDF® 切向流深度過濾系統 → 外泌體澄清（Clarification）

2. KrosFlo® KR2i TFF 切向流過濾系統 → 外泌體濃縮與換液（Concentration & Diafiltration）

此整合流程可全面取代傳統離心與多段過濾，顯著簡化製程。

1⃣ KrosFlo® TFDF®（外泌體過濾回收）

• 大孔徑設計（2–5 µm），EV 可完整通過

• 高通量、高流速（Flux > 650 LMH）

• 外泌體回收率高達 86%（與離心法相當）

• 封閉式、一次性系統，降低汙染風險

• 製程時間短（< 2.5 小時）

• 可直接放大至 2000 L 生物反應器規模

客戶效益： > 取代離心與二次深度過濾，降低人力成本並提升製程穩定度

2⃣ KrosFlo® KR2i TFF（外泌體濃縮與透析）

• 中空纖維濾膜（建議 750 kDa MWCO）

• 外泌體回收率 >90–92%（小量與放大量一致）

• <1% EV 進入透過液（Permeate）

• 自動化控制，完整數據記錄

• 相容一次性管路，符合 GMP 製程需求

客戶效益： > 在高回收率下有效保護 EV 結構與功能性，確保產品品質一致

Repligen 切向流製程已於實際應用中證實可完整保留外泌體關鍵品質屬性：

✔ 純度（Purity）

• 超過 70% 顆粒具脂質膜染色，確認為 EV

• 有效移除 >70% 宿主 DNA 雜質

✔ 身分鑑定（Identity）

• EV 特異性標誌蛋白完整保留：

o CD9 / CD63 / CD81

✔ 生物活性（Potency）

• In‑vitro wound healing assay 顯示：

o EV 處理組傷口癒合率 >80%

• 證實製程不影響 EV 功能活性

• 製程可從研發（0.5–3 L）無縫放大至商業規模

• 各尺度製程回收率與品質高度一致

• 每段下游步驟 <3 小時，適合高產能需求

• 封閉式、自動化、一次性系統，降低 GMP 導入風險